人胚肾细胞293T细胞是293 [HEK-293]细胞株插入了SV40 T-antigen的温度敏感基因形成的高转衍生株，广泛用于病毒包装。其有多种衍生株，比如HEK293，293T/17等，来源都是人胚胎肾细胞，其极少表达细胞外配体所需的内生受体，且比较容易转染，是一个很常用的表达研究外源基因的细胞株。

人胚肾 293 (HEK 293) 细胞是生物技术和研究中常用的细胞系之一。由于 HEK 293 细胞具有较高的生长效率，通常生成用于生物医学和药物研究的外源性蛋白质。HEK 293细胞 也会被用于各种转染实验中。

细胞名称：人胚肾细胞(STR鉴定正确)

细胞简称：293T

细胞别名：Hek293T; HEK-293T; HEK 293T; HEK-293-T; HEK 293 T;  293-T; 293 T; 293T; Human Embryonic Kidney 293T; 293tsA1609neo

产品货号：TCH-C101

种属来源：人

组织来源：胚肾

细胞形态：上皮细胞样

生长特性：贴壁生长

培养体系：DMEM-H+10%FBS+1%P/S

配套培养基货号：TCH-G101

传代比例：1:4-1:8，每2-3天换液一次

传代周期：24-48 h

培养条件：气相：95%空气+5%CO2，温度：37℃

冻存条件：60%基础培养基+30%FBS+10%DMSO，液氮储存

质量检测：细菌、真菌、支原体检测均为阴性

293T细胞培养注意要点

1. 293T细胞为贴壁细胞，细胞形态呈上皮样。293T细胞贴壁能力较弱，容易脱壁，操作应该轻拿轻放。培养基及PBS均需预热后使用。推荐复苏或传代时可使用提前用0.1%明胶包被过的培养瓶/皿，换液时，注意不要用力摇晃培养瓶/皿，培养基应沿培养瓶/皿壁缓慢加入，避免直接对着细胞吹打。

2. 293T细胞消化时间较短，0.25%胰酶消化时间为60s-90s。

3. 293T细胞生长速度很快，通常倍增时间不到24h，建议当细胞生长汇合度达到70-90%时进行传代操作，避免过汇合，过汇合可能会导致细胞聚团。

293T细胞聚团或脱落处理方法

收到常温293T细胞，在镜下发现细胞聚团或脱落怎么办？

该细胞因为贴壁松散，若购买常温细胞，收货时有可能大部分细胞脱离培养瓶壁，显微镜下找不到细胞，只能看到肉眼可见的细胞团，都是正常现象。请参照以下方式处理：

1. 收到细胞后请先置于培养箱中稳定2-4个小时后再进行下一步处理，不建议放置培养箱过夜后处理。

2. 将培养瓶内所有培养基转入无菌离心管，离心收集细胞（1100rpm，4min）。

3. 去掉上清，用PBS重悬细胞 (以手摇离心管的方式重悬，不要用移液枪吹)，将细胞收集到一个离心管中，再次离心(1200rpm, 3min)。

4. 去掉上清，加入1mL左右0.25%胰酶重悬细胞 (还是以手摇离心管的方式混匀，不要吹细胞), 放入培养箱消化2分钟。

5. 消化2分钟后，加入5mL含血清的培养基混匀终止消化，用移液枪轻轻吹打细胞悬液，使细胞团分散，离心 (1100rpm, 4min)。

6. 去掉上清，加入6mL左右的细胞相应的完全培养基混匀，视细胞量决定是1:2传代还是1:3传代 (由于细胞运输有损伤，首次传代建议比平时养密度稍高)。

7. 显微镜下观察细胞是否有分散成单颗，若有明显很大的细胞团需要重复上述步骤二次消化3~5个细胞的小团则不用干预，待细胞贴壁后再进行消化分散即可。

8. 第二天及时观察细胞贴壁情况，若贴壁细胞量过多细胞堆积，请于贴壁24小时后再次传代分瓶，若密度正常则继续生长，不建议换液，贴壁48小时后换液去除不能贴壁的细胞。